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黃曲霉B1快檢方法

更新時(shí)間:2017-08-15點(diǎn)擊次數(shù):2549

【產(chǎn) 品 簡(jiǎn) 介】 黃曲霉B1(Aflatoxin B1簡(jiǎn)寫為AFB1)是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃曲霉B1對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。國(guó)家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。本品的檢測(cè)靈敏度為5ng/ml(5ppb)。
【檢 測(cè) 原 理】 本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),通過單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB1單克隆抗體。
【樣 品 制 備】 1.谷物:任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm離心1min得上清液,將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再根據(jù)樣品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量,用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液??紤]不同樣品對(duì)黃曲霉B1的zui高含量要求,請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體:
谷物殘留*(ppb)
2.5
5
10
20
使用稀釋液體積(ml)
0.4
0.8
1.6
3.2
2.飼料(以殘留*50ppb計(jì)算):任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩,準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm離心1min得上清液,將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再以2ml的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液。如果殘留*是30ppb,則用1.2ml的稀釋液溶解;如果殘留*是40ppb,則用1.6ml的稀釋液溶解。
3.食用油:稱2.0g油樣于小燒杯中,用8ml正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min,吸去上層正乙烷層,再加入4ml的乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,靜置或3000rpm離心得上清液,將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4.醬油、醋、發(fā)酵酒:稱取25.0g樣品于小燒杯中,用5ml蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入20ml三氯*烷,加塞輕輕振搖3min,靜置分層。放出下層三氯*烷層,經(jīng)盛有約5g預(yù)先用三氯*烷濕潤(rùn)的無(wú)水Na2SO4過濾器于蒸發(fā)皿中,zui后用少量三氯*烷洗滌過濾器,洗液并于蒸發(fā)皿中,用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后,準(zhǔn)確加入稀釋液,將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。
【檢 測(cè) 步 驟】 1. 在進(jìn)行檢測(cè)前先完整閱讀使用說(shuō)明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫;
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請(qǐng)?jiān)?小時(shí)內(nèi)盡快使用;
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加3滴于加樣孔中,加樣后開始計(jì)時(shí);
4. 結(jié)果應(yīng)在10min內(nèi)讀取,超過12min的時(shí)間判讀無(wú)效。

【結(jié) 果 判 定】 1.陽(yáng)性:位置C顯示出紅色線條,而位置 T不顯色時(shí),或者位置C顯示出紅色線條,位置 T顯示顏色非常模糊時(shí),判為陽(yáng)性。陽(yáng)性結(jié)果表明:AFB1含量超過樣品允許量。
2.陰性:位置C顯示出紅色線條,位置 T同時(shí)顯示出紅色線條,且T線顏色接近C線或者深于C線時(shí),判為陰性。陰性結(jié)果表明:AFB1含量低于樣品允許量。
3.無(wú)效:位置C不顯示出紅色線條,而位置 T顯示出紅色線條,該試紙卡視為無(wú)效。建議使用新的試紙卡按本說(shuō)明書要求重新測(cè)試。
【注 意 事 項(xiàng)】 1.請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試,操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū)。
2.如購(gòu)買時(shí)發(fā)現(xiàn)過期,破損,污染,無(wú)效的產(chǎn)品,請(qǐng)到購(gòu)買處進(jìn)行更換。
3.本品為一次性產(chǎn)品,請(qǐng)勿重復(fù)使用。
4.如遇稀釋液不足,請(qǐng)用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。
5.本品為篩選試劑,任何陽(yáng)性結(jié)果請(qǐng)用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。
6.有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試后作為判斷參考。
【儲(chǔ)藏條件與有效期】本品應(yīng)保存在干燥陰涼處(4--30℃),有效期18個(gè)月。
【配 置 清 單】
【備 注】 本產(chǎn)品僅適用于疑似問題食品的初篩,檢測(cè)結(jié)果不具有法律效力,不能作為執(zhí)法依據(jù)。

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