依利特色譜柱作為一種高效的分析工具,在生物醫(yī)藥、食品、環(huán)境及生化等領域中發(fā)揮著重要作用。其基本原理基于液相色譜技術,通過固定相和流動相的選擇與優(yōu)化,實現(xiàn)生物樣品中目標分子的高效、準確分離和檢測。
基本原理
依利特色譜柱的核心在于其液相色譜技術。該技術利用液體作為流動相,通過柱子內(nèi)的固定相對樣品中的不同成分進行吸附和解吸,從而實現(xiàn)分離。在色譜柱中,不同的物質(zhì)因其物理化學性質(zhì)(如極性、分子大小、電荷等)不同,會在固定相和流動相之間發(fā)生不同的相互作用,導致它們在柱子中的移動速度不同,進而達到分離的目的。
操作指南
開機與準備
1.開機:首先,按下溶劑輸液泵上的power鍵,等待自檢完畢后開始操作。
2.排氣:逆時針旋轉排氣閥(不超過180°),打開排氣閥,按purge鍵排氣泡,直至流動相連續(xù)流出且無氣泡。
3.設定流速:按Pump鍵啟動泵,觀察屏幕上壓力顯示,待壓力上升平穩(wěn)后,逐步升高流速至實驗所需。
4.檢測器與工作站:打開檢測器,調(diào)節(jié)至實驗所需波長;打開工作站,查看基線,待基線走平后準備進樣。
進樣與分析
1.樣品準備:將待測樣品溶解在合適的溶劑中,并進行必要的預處理,如過濾、稀釋等。
2.進樣:將預處理后的樣品注入進樣器,通過移液器將樣品送入色譜柱。
3.分離與檢測:樣品在色譜柱中經(jīng)過吸附和解吸過程,分離成不同成分。隨后,通過檢測器(如紫外線檢測器、熒光檢測器等)進行檢測,將檢測到的信號轉化為電信號,并通過數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)記錄。
維護與保養(yǎng)
1.沖洗:實驗結束后,使用水或含水甲醇溶液沖洗色譜柱,確保無殘留物。若流動相含有無機鹽,需保證足夠的沖洗時間。
2.清洗:定期清洗單向閥和吸濾頭,使用純凈水和異丙醇進行超聲清洗。同時,定期沖洗檢測池,以去除雜質(zhì)和微生物。
3.保護柱的使用:加裝保護柱可有效過濾流動相和樣品中的不溶物和化學污染,延長色譜柱的使用壽命。保護柱應定期更換,以避免柱壓過高或峰形變壞。